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行業(yè)新聞

分子生物學實驗室常用儀器設備有哪些

發(fā)布日期:2022-06-24

分子生物學是近代的產物,對于微生物檢測領域很重要,而分子生物學實驗室就是專業(yè)研究分子生物學的實驗室,分子生物學實驗室中要用到非常多的儀器設備,那么常用的儀器設備有哪些呢,本文給大家詳細介紹下分子生物學實驗室中常用的儀器設備。


(一) 溫度控制: 

1、冰箱:根據藥品、試劑及多種生物制劑保存的需要,必須具備不同控溫級別的冰箱,最常使用的有:4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃適合儲存某些溶液、試劑、藥品等。 -20℃適用于某些試劑、藥品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白質樣品等。-80℃適合某些長期低溫保存的樣品、純化的樣品、特殊的低溫處理消化液等的保存。0-10℃的冷柜適合低溫條件下的電泳、層析、透析等實驗。

2、液氮罐:有些實驗材料、某些器官組織、細胞株、菌株及純化的樣品等,要求速凍和長期保存在超低溫環(huán)境下,就需要一個液氮罐(-196℃)具有經濟、省力和較好地保持細胞生物學特性的優(yōu)點。

3、培養(yǎng)箱:37℃恒溫箱用于細菌的固體培養(yǎng)和細胞培養(yǎng)。二氧化碳培養(yǎng)箱適用于培養(yǎng)各種細胞,可恒定地提供一定量的CO2(通常5%),用來維持培養(yǎng)液的酸度(pH值)。37℃恒溫空氣搖床可進行液體細菌的培養(yǎng)。

4、水浴鍋:用于保溫。 25-100℃水浴搖床可用于分子雜交試驗,各種生物化學酶反應等試驗的保溫。25-100℃水浴箱用于常規(guī)試驗。

5、烘箱:主用于烘干實驗器皿,有些需要溫度高些,有些需要溫度低些。用于RNA方面的實驗用具,需要在250℃烤箱中烘干,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進行烘干。 


(二)水的凈化:

隨著分子生物學的飛速發(fā)展,許多實驗對水純度的要求越來越高。 

1、蒸餾水皿:單蒸水常難以滿足實驗要求。雙蒸水、三蒸水配液,許多實驗要去離子水。多次蒸餾水可除去水中揮發(fā)性雜質,不能完全除去水中溶解的氣體雜質(Mn2+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Mo(Ⅵ))。

2、離子交換器:去離子水—用離子交換法制取的水,稱去離子水。去離子效果好,但不能除去水中的非離子型雜質,其中常含有微量的有機物(樹脂等)

3、超純水:用蒸餾水、離子交換水、反滲透純水做為供水,磁鐵耦合齒輪泵作用使水循環(huán)。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA測序、酶反應、組織和細胞培養(yǎng)等。


(三)消毒滅菌:

分子生物學所用大部分試劑,而且實驗用具都應嚴格消毒滅菌。

1、蒸汽消毒鍋:用于小批量物品的隨時消毒。大批實驗物品、試劑、培養(yǎng)基可使用大型消毒且定時進行消毒 

2、紫外線:75%乙醇 、0.1%SDS(消毒劑),一些耐高壓、高溫消毒且可用紫外線照射或乙醇和SDS浸泡。紫外線照射使用方便,且很方便,但滅菌效果與距離有關,且產生臭氧污染安全,用于無菌室,超凈臺和塑料用具的消毒。

3、濾器濾膜:不耐高溫、高壓的試劑用其處菌。

4、煮沸消毒:主用于金屬器械和針急需時采用。


(四) 稱重計量: 

1、稱量系統(tǒng):(各種天平)臺秤、托盤天平、鈕力擺動天平、 光電分子天平、精密電子分析天平等

2、液體體積的度量:

精:量筒、移液管、微量取液器

粗:刻度試管、燒杯、錐形瓶

3、pH值測量: 

pH計:測定溶液中H+的直接電位的儀器,主要通過一對電極,在不同的pH溶液中產生不同的電動勢用pH值表示出來。

pH試紙:只適用于培養(yǎng)液、酚飽和液、緩沖液或其它試劑溶液的pH值的粗略估計。而大部分試劑的配制要求嚴格的pH值,需精確度高(小數(shù)點后兩位)的pH計。

4、OD值測量:

光密度、分光光度計是利用物質在可見光和紫外線區(qū)域中的吸收光譜來鑒定該物質的性質及其含量的一種儀器。它是由光源、單色器、吸收池、接收器、測量儀表或顯示屏幕所組成。OD值是許多溶液中溶質定量的方便指標之一,通過所產生的單色光而測定某一溶液對該單色光的吸收值,利用它可進行核酸溶液定量和純度的初步判斷。 


(五)離心機:

離心技術是研究生物的結構和功能中不可缺少的一種物理技術手段。因為各種物質在沉淀系數(shù)、浮力、和質量等方面有差異,可利用強大的離心力場,使其分離、純化和濃縮。目前有各種各樣的離心機??晒┥儆?.05ml到幾升的樣品離心之用。離心技術應用廣泛,包括收集和分離細胞、細胞器和生物大分子等。據其轉速的不同,可分為以下幾種類型: 

1、普通離心機:最大轉速6000 r/m ,最大離心力6000g

①臺式離心機:是離心機中最簡單而廉價的,最常用于收集快速沉降系數(shù)的物質,如紅細胞、粗大的沉淀物、酵母菌和細菌等。

②低速冷凍離心機:主要用于細胞、細胞核、細胞膜和細菌的沉淀和收集等。

2、高速離心機:最大轉速25000 r/m ,最大離心力89000g

有冷凍和常溫兩種,多用于制備和手收集微生物、細胞碎片、細胞、大的細胞器、硫酸銨沉淀物以及免疫沉淀物等。

3、超速離心機:最大轉速9000 r/m ,最大離心力694000g。

4、臺式超速離心機:最大轉速12000r/m ,最大離心力625000g。



(六)超凈工作臺:

內有紫外燈、照明燈、還應有酒精燈火焰、75%乙醇等滅菌的設備,是一種提供局部潔凈度的設備。其原理是鼓風機驅動空氣,經過低、中效的過濾器后,通過工作臺面,使實驗操作區(qū)域成為無菌的環(huán)境。超凈臺按氣流方向的不同大致有幾種類型: 

1、側流式:凈化后氣流,從左側或右側通過工作臺面,流向對側,或者從上往下或從下往上流向對側,他們都能形成氣流屏障而保障臺面無菌。

缺點:在凈化氣流和外邊氣體交界處,可因氣體的流向而出現(xiàn)負壓,使少量的未凈化氣體混入,而造成污染。

2、外流式:氣流是面向操作人員的方向流動,從而保證外面氣體不能混入。缺點:在進行有害物質實驗時,對操作人員不利,但可采用有機玻璃把上半部分擋起來,使氣流往下方流出。


(七)電泳系統(tǒng):

電泳技術是檢測、鑒定各種生物大分子的純度、含量及描述它們的特征,甚至還是分離、純化、回收和濃縮樣品的工具之一。原理是核酸和蛋白質等都帶有電荷,當它們被置于電場中時,能夠移動。電泳裝置由兩部分組成:電源裝置和電泳槽裝置。

1、電泳裝置:電源需經穩(wěn)流通過穩(wěn)壓器,既能提供穩(wěn)定的直流電,又能輸出穩(wěn)定的電壓??捎糜谌N: 

常度穩(wěn)壓電泳儀:輸出電壓0-500v  0-15mA

中度穩(wěn)壓電泳儀:輸出電壓400-1000v

高度穩(wěn)壓電泳儀:輸出電壓1000以上的電源裝置。

2、電泳槽裝置:分兩種

水平式電泳槽:一般分為微型電泳槽和大型水平式電泳槽

垂直式電泳槽:分垂直平板電泳槽和圓柱形電泳槽裝置。 


(八)PCR儀:

Polymerase Chain Reaction儀,也稱DNA熱循環(huán)儀,基因擴增,它是使一對寡核苷酸引物結合到正負DNA鏈上的靶序列兩側,從而酶促合成拷貝數(shù)百萬倍的靶序列DNA片段,它的每一循環(huán)包括在三種不同溫度進行的DNA變性,引物復性,DNA聚合酶催化的延伸反應三個過程。        


(九)凝膠成像分析系統(tǒng):  

對電泳后含溴乙錠(EB)核酸樣品的觀察分析。 


(十)干燥設備:

1、真空加熱干燥箱:核酸在硝酸纖維素膜和尼龍膜上固定,用于雜交實驗。

2、電泳凝膠干燥箱:電泳后的凝膠進行脫水干燥的儀器,一般可將凝膠干燥到一些玻璃紙上,干燥后的凝膠易于保存。

3、液氮冷凍干燥:適用于活性蛋白質樣品的干燥與結晶。

4、真空泵:許多實驗都需要抽真空。如:乙醇沉淀后核酸樣品的干燥,電泳凝膠的干燥等。 


(十一) 其他常規(guī)儀器及設備:

1、微波爐:便于一些溶液的快速加熱和定溫加熱,電泳瓊脂糖凝膠配制、溶化等。

2、制冰機:用于制造大多數(shù)核酸、蛋白質的實驗操作所需的低溫環(huán)境,以減少核酸酶或蛋白質酶的水解。

3、層析裝置:(色譜分離)是一種分離多組分混合物的有效物理方法。

4、真空印記系統(tǒng),DNA合成/測序儀:這些都是對核酸進行深入研究的必備儀器。

5、磁力攪拌器:多角度旋轉混勻器、快速振蕩混合器:用于混合儀器。

6、組織勻漿器:超聲組織及細胞破碎器,用其進行樣品的分離提純實驗。

7、通風櫥:很多溶劑能逸出毒氣,必備柜 ,放射性試驗還要有有機玻璃屏蔽。

8、玻璃蒸餾器、電熱加帽、變壓器:用于酚等有機溶劑的蒸餾。

9、Tip頭、Ep管: 微管移液器tip頭(吸液尖)、Ep管(微量離心管)可洗滌,硅化消毒后反復使用。對一些要求嚴格的實驗,如RNA的提取、保存等操作,應使用新的消毒tip頭與Ep管。另外還應備有常用規(guī)格的離心管(1000ml、500 ml、250 ml、50 ml、7 ml等)及96孔、24孔、12孔、6孔的細胞培養(yǎng)塑料平板等。

10小型設備、用具: 定時器、濾膜、保鮮膜、防護眼鏡鴨嘴鑷、常規(guī)的玻璃或塑料器皿(包括平皿、試管、燒杯、量瓶、試劑分液漏斗、避光保存的試劑應使用棕色試劑瓶,如飽和酚、巰基乙醇等)、記號筆、各種手套PE、乳膠、家用、防酸的等)


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